默克細胞培養(yǎng)扳的相關(guān)知識
更新時間：2022-11-17 瀏覽次數(shù)：583
細胞培養(yǎng)板緊密貼合的孔蓋，可有效防止細胞培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基的污染與蒸發(fā)的損耗。
細胞培養(yǎng)板在進行細胞操作時同樣遵循嚴(yán)格無菌的原則，各項操作要保證規(guī)范、科學(xué)，不對細胞的生長造成額外的影響。這其中最常見的問題就是如何保證加樣后細胞的均勻和盡量減少換液對細胞生長狀態(tài)的影響。
24孔培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿的蓋子都很松，這樣是方便了透氣，但是細菌、霉菌等污染物會不會也隨著溜進去呢？
蓋子很松，屬于半開放培養(yǎng)，這樣的目的是透氣（實際上是為了使培養(yǎng)皿外的CO2能夠與培養(yǎng)皿充分交換，維持培養(yǎng)基的pH值）。
凡事有利必有弊，這樣當(dāng)然增加了污染的可能性。此外這樣還會使培養(yǎng)皿內(nèi)的液體蒸發(fā)，這對于精確定量的藥物來說就顯得值得注意了。所以以下二條措施是必須的a培養(yǎng)箱內(nèi)空氣必須清潔（定期紫外線照，酒精擦洗，盡量少開關(guān)培養(yǎng)箱）b培養(yǎng)箱內(nèi)的濕度必須始終保持為100%（培養(yǎng)箱內(nèi)放置無菌蒸餾水的水槽）。
就好像培養(yǎng)皿，也是一個蓋倒扣的容器，也不會污染。主要是因為蓋子“L"型邊緣產(chǎn)生氣流負(fù)壓的緣故，灰塵上面才附著有微生物，而氣流攜帶的灰塵是無法通過產(chǎn)生負(fù)壓的蓋邊緣的。而透氣作用只是通過空氣的擴散，不會產(chǎn)生氣流，所以只會透氣不會透菌。
培養(yǎng)過細胞的人都知道，細胞如何的嬌貴，日復(fù)一日精心地呵護，一個不慎就全軍覆沒。細胞培養(yǎng)，從來就不是一個容易的過程。那么關(guān)于細胞培養(yǎng)的基本知識你又了解多少呢？
首先，操作前準(zhǔn)備工作：
1、玻璃吸管和玻璃培養(yǎng)瓶的消毒：1)高壓蒸汽滅菌15分鐘以上；2)干烤消毒140度2小時以上；
2、無菌工作臺先清洗后用75%酒精擦拭干凈，紫外線照射40分鐘以上；各種培養(yǎng)板照射3小時以上；
3、培養(yǎng)基(pH7.2)和血清配制好后要做無菌試驗:將血清按10%加入培養(yǎng)基內(nèi)，用無菌的玻璃離心管或玻璃瓶取培養(yǎng)基5-10ml置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2-3天，肉眼見無渾濁或沉淀等異物。分裝后置-20度保存；
4、消化液(pH7.8)或其它加入液，應(yīng)用高壓蒸汽滅菌或一次性無菌濾器過濾除菌，分裝成支置-20度保存；
5、各種凍存的液體復(fù)溫時應(yīng)邊搖邊融化，否則有的液體(特別是培養(yǎng)基)容易產(chǎn)生沉淀；
6、培養(yǎng)箱應(yīng)先用清水清洗后用75%酒精擦拭一遍(如有紫外線的應(yīng)照射1小時以上，如有高溫滅菌的應(yīng)按程序來菌)。至少每月一次；
7、進入操作時應(yīng)注意先清洗雙手及手腕，然后用75%酒精擦拭，操作時注意無菌臺內(nèi)空間層次；手及物品不要在暴露的瓶口上方來往，如果數(shù)量較多，培養(yǎng)瓶應(yīng)放在與酒精燈平行地方便于操作，瓶與瓶之間應(yīng)相隔一定的距離，開瓶(蓋)時應(yīng)先用75%酒精反復(fù)擦拭或用燈燒，開開后應(yīng)用燈先燒口，然后燒蓋。用完后同樣操作。整個操作過程盡量在無菌臺靠里面一點。
- (上一篇)：斜面培養(yǎng)基的制作方法
- (下一篇)：杰星知識分享：載體蛋白